上期肝脏类器官的干货中，小恒介绍了肝细胞类器官的建立和鉴定，这种类器官中几乎仅包含单一的肝细胞类型，适用于单纯研究肝细胞的发育、功能及相关生理病理过程。然而，要模拟相对完整的肝脏组织功能，则需要形成含有肝细胞和胆管细胞的类器官，称之为肝胆类器官（Hepatobiliary organoid股票线上配资，HBO）。功能性HBO的开发对于肝脏移植和再生的临床应用至关重要。本期小恒根据现有的文献方法带大家了解下HBO的建立过程。
1. 肝胆系统
肝脏由肝实质细胞和非肝实质细胞构成，这些细胞组成的功能单元称为肝小叶。肝实质细胞发育源自内胚层肝憩室，包含肝细胞和胆管细胞，其中胆管细胞构成胆道以运输胆汁。肝细胞和胆道在结构和功能上构成了一个不可分割的有机整体。
（1）结构上，胆道系统如同一棵树的枝干，其最微小的分支（即毛细胆管）深植于肝细胞之间，负责收集肝脏持续生产的胆汁，并通过各级胆管最终输送至肠道。
（2）功能上，肝细胞是胆汁生成和分泌的唯一场所，而胆囊与胆道则负责储存、浓缩和运输胆汁，二者协同完成消化脂肪、吸收脂溶性维生素及排泄废物（如胆红素）等关键生理任务。
展开剩余88%2. 肝胆类器官（HBO）
如前所述，HBO包含两种关键的肝脏实质细胞—肝细胞和胆管细胞，它保留了肝脏和胆道系统的生理和组织学特征，能够模拟肝脏和胆道的生理结构和功能，是一种具有功能性的肝脏类器官。HBO作为近年来才得到发展的肝脏类器官，已成功通过成体肝细胞、肝脏祖细胞以及iPSC诱导出HBO，并验证其具备肝胆组织的核心生理功能，包括白蛋白分泌、细胞色素 P450（CYP）酶活性、胆汁酸代谢、胆红素转运等，部分模型可在体内移植后重建肝胆结构并维持功能[1, 2]。
3. HBO建立方法
3.1 化学诱导肝祖细胞（hCLiPs）来源的HBO[1]
3.1.1 细胞来源及主要试剂耗材
（1）细胞来源：健康人源冷冻肝细胞或患者来源的肝细胞。
（2）培养基及试剂：
① STIM培养基：用于初始肝细胞贴壁；肝细胞培养基 + EGF + Pen/Strep/Glu + 10% FBS。
② FAC培养基：用于诱导 hCLiPs；DMEM/F12 + 补充成分 + A-83-01、CHIR99021 + 10
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